使用方法：

1、首先將試劑盒恢復(fù)室溫（大約30分），然后用純水把清洗液配成工作濃度（一份濃縮清洗液加19份純水）。

2、取出酶標(biāo)板。每個(gè)標(biāo)本需要8孔，陽性對(duì)照8孔，陰性對(duì)照8孔。多余的用自封袋保存，記得放入干燥劑。

3、將標(biāo)本檢測(cè)孔每孔先加入標(biāo)本稀釋液各50μl。然后將50μl細(xì)胞培養(yǎng)上清（或特異親和純化的抗體）再加入酶標(biāo)微孔板，每個(gè)標(biāo)本加8孔；陽性對(duì)照和陰性對(duì)照各8孔每孔100μl此處不加標(biāo)本稀釋液。貼上封板膜37℃溫育30分鐘。

4、棄去板內(nèi)液體，手工洗板5遍后在不掉纖維的吸水材料上拍干（或機(jī)洗5遍）。再在每個(gè)標(biāo)本的6孔中分別加入8種 酶標(biāo)二抗各100μl，通用陽性、陰性對(duì)照的各孔也一樣。在加樣圖上或酶標(biāo)板上做好標(biāo)記。貼上封板膜37℃溫育30分鐘。

5、吸棄板內(nèi)液體，手工洗板5遍后在不掉纖維的吸水材料上拍干（或機(jī)洗5遍）。每孔分別加入顯色劑A和顯色劑B各50μl，換一張新的封板膜貼板避光37℃顯色20分鐘。

6、本試劑盒特異性好一般肉眼即可觀察出結(jié)果，看顯色藍(lán)的那個(gè)孔所對(duì)應(yīng)的酶標(biāo)二抗就知道此標(biāo)本的Ig類或亞類。更可將反應(yīng)終止液（每孔50μl）終止反應(yīng)后用酶標(biāo)儀450nm測(cè)定波長(zhǎng)，630nm參考波長(zhǎng)雙波長(zhǎng)測(cè)定結(jié)果，參看高值孔所對(duì)應(yīng)的酶標(biāo)二抗就知道此標(biāo)本的Ig類或亞類亞型(陽性對(duì)照OD一般不小于0.8，陰性對(duì)照一般不高于0.15，陽性判定標(biāo)準(zhǔn)：樣品OD大于陰性OD+0.15，陰性OD低于0.05按0.05算)。